También conocido como
Citometría de flujo
Inmunohistoquímica
Inmunofenotipo
Nombre sistemático
Inmunofenotipado
Este artículo fue revisado por última vez el
Este artículo fue modificado por última vez el 11.12.2017.
Aspectos Generales
¿Por qué hacer el análisis?
Para diagnosticar y clasificar leucemias y linfomas; como ayuda al tratamiento; para detectar y evaluar células leucocitarias cancerosas que pueden haber quedado después del tratamiento o cuando se producen recidivas de la enfermedad.
¿Cuándo hacer el análisis?
Cuando existen signos o síntomas sugerentes de leucemia o linfoma; en el momento del diagnóstico, para establecer el subtipo específico de leucemia o linfoma; a veces para establecer la eficacia del tratamiento o para evaluar recidivas de la enfermedad.
¿Qué muestra se requiere?

La determinación se realiza a partir de una muestra de sangre venosa; a veces, muestra de médula ósea, una biopsia tisular o algún fluido del organismo.

¿Es necesario algún tipo de preparación previa?
Para esta prueba no se necesita ninguna preparación especial.

Quizás pueda encontrar los resultados de los análisis que se le han realizado en la página web de su laboratorio. Sin embargo, actualmente está en Lab Tests Online. Es posible que haya sido dirigido aquí por el sitio web de su laboratorio para que así pueda conseguir información útil sobre la (s) prueba (s) que se realizó.

Lab Tests Online es un sitio web de educación para el paciente que ofrece información sobre pruebas de laboratorio y que fue galardonado en el año 2009 con el Premio a las Mejores Iniciativas de Servicio al Paciente que convoca la Fundación Farmaindustria en el apartado correspondiente a sociedades científicas y profesionales.

El contenido de esta página ha sido revisado por especialistas del laboratorio. En ella, se proporcionan explicaciones generales de lo que podrían significar los resultados para cada una de las pruebas aquí desarrolladas. Por ejemplo, lo que podría significar obtener un valor alto o bajo en el contexto de su estado de salud.

Para conseguir los resultados de su análisis, deberá dirigirse al sitio web de su laboratorio o comunicarse con su médico.

Los rangos de referencia de las pruebas que se le han realizado los encontrará seguramente en su informe de laboratorio. Normalmente se encuentran a la derecha de los resultados.

Si no dispone del informe de laboratorio y desea obtener un rango de referencia, consulte a su médico o al laboratorio que realizó los análisis. Los resultados de las pruebas de laboratorio no tienen sentido por sí mismos. Toman significado cuando se comparan con los rangos de referencia. Los rangos de referencia son los valores esperados para una persona sana. A veces se les llama también valores "normales". Al comparar el resultado de una prueba con los valores de referencia, se puede ver si el resultado se encuentra fuera del rango de valores esperados. Los valores que están fuera de los rangos esperados pueden proporcionar pistas para ayudar a identificar posibles enfermedades o trastornos. Si bien la precisión de las pruebas de laboratorio ha evolucionado significativamente en las últimas décadas, puede existir cierta variabilidad entre laboratorios debido a las diferencias en los reactivos químicos empleados, las técnicas de medida y los analizadores o instrumentos que se utilizan. Esta es la razón por la que se proporcionan tan pocos rangos de referencia en esta página web. Es importante saber que, para evaluar si los resultados están "dentro de los límites normales", se debe aplicar el rango de referencia proporcionado por el laboratorio que realizó el análisis. Si desea obtener más información, refiérase al artículo Intervalos de referencia y su significado.

¿Qué es lo que se analiza?
Por inmunofenotipado se detecta la presencia (o ausencia) de antígenos leucocitarios. Estos antígenos son estructuras proteicas que se encuentran en la superficie o en el interior de los leucocitos. Los antígenos son específicos de tipos celulares específicos y se agrupan de una manera natural en los leucocitos. En leucemias y linfomas se observan agrupaciones características atípicas. Así, el inmunofenotipado resulta útil en el diagnóstico y clasificación de estos tipos de cánceres.
 
Las leucemias y los linfomas son consecuencia de una multiplicación celular anómala y descontrolada (clonación). Los linfocitos anómalos o las células monoclonales mieloides proliferan y dejan de llevar a cabo su función normal y de combatir las infecciones. Al no morir al mismo ritmo que las células normales, se acumulan en la médula ósea, en los ganglios linfáticos o en otros tejidos en los que van multiplicándose. A medida que aumenta el número de células en la médula ósea, las células normales quedan desplazadas por las cancerosas, inhibiéndose la síntesis de las primeras. Las células anómalas incluso pueden liberarse desde la médula ósea hacia la sangre.
 
El hemograma y la fórmula leucocitaria pueden sugerir la presencia de leucemia o linfoma, ya que en ellos se puede observar un aumento de leucocitos con un predominio de alguno de sus subtipos. Normalmente serán necesarios estudios adicionales para establecer tales diagnósticos, puesto que con el hemograma y con la fórmula leucocitaria no se puede confirmar la presencia de células leucocitarias monoclonales ni se puede diferenciar entre los diferentes tipos de células sanguíneas cancerosas.
 
Para obtener toda esta información, se solicitan pruebas adicionales en otros tipos de muestra, como médula ósea u otros tejidos. Además de identificar el tipo específico de leucemia o linfoma, se puede establecer así su agresividad y/o su posible respuesta al tratamiento. La identificación de los distintos tipos de leucemias y linfomas se basa en la presencia o ausencia de antígenos y en los patrones específicos que mantienen en cada leucemia o linfoma.
 
Las células atípicas o anómalas presentan agrupaciones de antígenos características consistentes con los diferentes tipos de leucemias y linfomas. Estas identificaciones se basan en una "biblioteca" de asociaciones y de patrones antigénicos descritos a lo largo de los años.
 
La mayor parte de antígenos detectados con el inmunofenotipado se identifican con las siglas CD (por sus siglas en inglés, cluster differentiation o cluster designation) seguidas de un número (refiérase a ¿Qué significa el resultado?). Los números se han establecido por convención siguiendo un consenso internacional. A pesar de que se han identificado centenares de antígenos a los que se ha asignado un CD con un número específico y único, tan solo se trabaja rutinariamente con algunos de ellos.
 
¿Cómo se obtiene la muestra para el análisis?
Extracción de la muestra por punción de una vena del antebrazo; además, se realiza una biopsia o un aspirado de médula ósea. Se obtienen por biopsia muestras de tejidos, como ganglios linfáticos; pueden obtenerse también muestras de fluidos del organismo por punción y aspiración.
 
¿Se requiere alguna preparación previa para asegurar la calidad de la muestra?
Para esta prueba no se requiere ninguna preparación especial.
 
NOTA: En el apartado, El laboratorio por dentro, encontrará información sobre la recogida y procesamiento de las muestras de sangre y los cultivos de esputo. 
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Preguntas comunes
  • ¿Cómo se utiliza?
    El inmunofenotipado se utiliza principalmente para establecer el diagnóstico y para clasificar unos tipos de cáncer de células sanguíneas, leucemias y linfomas, así como para saber cual será el tratamiento más adecuado. Puede solicitarse cuando en el hemograma y en la fórmula leucocitaria se detecta un aumento del número de linfocitos o la presencia de células sanguíneas inmaduras; también cuando existe una alteración importante en el número de plaquetas, ya sea un aumento (trombocitosis) o una disminución (trombocitopenia).
     
    Las muestras se analizan empleando unos perfiles de anticuerpos específicos y establecidos para varios tipos de leucemias (como leucemia linfoblástica aguda, leucemia mieloide aguda, tricoleucemia, eritroleucemia) y linfoma (linfoma de células B, linfomas de células T).
     
    En caso de sospecha de leucemia o linfoma se solicitan hemograma, fórmula leucocitaria y recuento de plaquetas, además del inmunofenotipado. En función de la información obtenida con estas pruebas se selecciona el panel o perfil de anticuerpos necesarios para identificar los antígenos característicos.
     
    También se realiza el inmunofenotipado para evaluar la efectividad del tratamiento y para detectar enfermedad residual o recidivas de la enfermedad.
  • ¿Cuándo se solicita?
    El inmunofenotipado se solicita cuando se detecta un aumento del número de linfocitos (o de algún otro tipo de leucocito), una alteración del recuento de plaquetas (aumento o disminución) o la presencia de formas inmaduras de leucocitos no presentes normalmente en personas sanas. Estas alteracions pueden constituir la primera señal de que existe un cáncer de células de la sangre. Los signos y síntomas de una leucemia o de un linfoma pueden ser leves o inespecíficos.
     
    Algunos ejemplos de signos y síntomas incluyen:
    • Cansancio, debilidad
    • Pérdida de peso inexplicable, pérdida de apetito
    • Dificultad para respirar al realizar ejercicio
    • Palidez cutánea
    • Sangrados o hematomas de fácil aparición
    • Fiebre
    • Dolor óseo y de las articulaciones
    • Aumento del tamaño de ganglios linfáticos, bazo, hígado, riñones y/o testículos
    • Dolores de cabeza
    • Vómitos
    • Sudoración nocturna

    También se solicita la prueba para evaluar la efectividad del tratamiento y para detectar enfermedad residual o recidivas de la enfermedad.

  • ¿Qué significa el resultado?
    Para interpretar los resultados del inmunofenotipado se requiere experiencia. El especialista considera los resultados del hemograma, de la fórmula leucocitaria, de la extensión de sangre, del estudio de la médula ósea junto con los del inmunofenotipado para proporcionar un diagnóstico, e incluye su interpretación en el informe de laboratorio.
     
    Los marcadores presentes en las células y detectados por inmunofenotipado contribuyen a caracterizar las células anómalas. Esta información y la obtenida de la historia clínica, del examen físico y de los signos y síntomas permiten establecer el diagnóstico.
     
    A pesar de que los resultados se establecen por comparación a resultados "normales" y frente a asociaciones conocidas de antígenos con leucemias y linfomas, debe evaluarse cada caso individualmente. Puede ser que un individuo no presente ninguna asociación de antígenos característicamente observada en estos tipos de cáncer, y no por ello se excluye el diagnóstico de leucemia o de linfoma.
     
    Se suelen observar perfiles de inmunofenotipado anómalos en: leucemia mieloide (mielogénica) aguda, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielocítica crónica, linfoma no Hodgkin de células B, linfomas no Hodgkin  de células T, eritroleucemia, leucemia megaloblástica y mieloma múltiple.
     
    En la tabla siguiente se listan ejemplos de marcadores a menudo expresados (e identificados) en algunos tipos celulares.
     
    Célula Marcadores
    Células precursoras inmaduras HLA-DR, TdT, CD34, CD38, CD117
    Linfocitos B

    CD19, CD20, CD22, CD79a, cadenas pesadas (gamma, alfa, mu o delta) y ligeras (kappa o lambda) de inmunoglobulinas

    CD10 (célula pre-B)

    Linfocitos T CD2, CD3, CD5, CD7, y CD4 o bien CD8
    Células mieloides (granulocitos) MPO (mieloperoxidasa), CD11, CD13, CD15, CD16b, CD33, CD66
    Células asesinas (NK, natural killer) CD11b, CD16, CD56
     
    A continuación se citan marcadores sugerentes de algún tipo de diferenciación celular.
     
    Célula Marcador
    Diferenciación megacariocítica; plaquetas CD31, CD36, CD41, CD42, CD61
    Diferenciación eritroide; hematíes CD235a
    Diferenciación monocítica CD14, CD33, CD64, CD68
    Tricoleucemia CD11c, CD103
     
     
  • ¿Hay algo más que debería saber?
    El análisis de los subtipos de linfocitos en función de la expresión de CD3, CD4 y CD8 se realiza en otro contexto para monitorizar la infección por el VIH o el SIDA. Si desea más información refiérase a CD4 y CD8.
  • ¿Cuál es el tipo de muestra más adecuado (sangre, médula ósea, tejido) para realizar el inmunofenotipado?
    El médico decidirá cual es la muestra idónea y más representativa para un tipo de cáncer determinado. En caso de detectarse células cancerosas en sangre, se analizará por inmunofenotipado una muestra de sangre al ser fácil de obtener (procedimiento menos invasivo para el enfermo que la obtención de otras muestras). En el caso de linfomas, es frecuente analizar otros tipos de muestra.
  • ¿Puede realizarse el inmunofenotipado en la misma consulta médica?
    No. Para realizar el inmunofenotipado e interpretar los resultados se necesita personal con mucha experiencia. No todos los laboratorios pueden ofrecer este tipo de estudio, aunque sí se realiza en los grandes hospitales. A veces la muestra se envía a un laboratorio de referencia.
  • ¿Se puede predecir la evolución del cáncer a partir de los resultados del inmunofenotipado?
    El diagnóstico de leucemia o de linfoma se realiza por examen microscópico de una extensión de sangre y/o por aspirado o biopsia de médula ósea. En función de los patrones de asociación de antígenos detectados y de las asociaciones que ya se conocen con determinados tipos de cáncer, el médico determina el tratamiento que debe instaurar y la agresividad del mismo así como la probabilidad de respuesta al tratamiento.
  • ¿Pueden cambiar con el tiempo los antígenos detectados?
    Los antígenos presentes en células cancerosas monoclonales específicas no suelen variar. Sin embargo, las células anómalas pueden eliminarse gracias a la quimioterapia o a la radioterapia. Si el tratamiento es efectivo, las células normales sustituirán y reemplazarán a las células anómalas. Así, los resultados del inmunofenotipado reflejarán la población de leucocitos en el momento de la remisión de la enfermedad y podrán ser diferentes a los del inmunofenotipado anterior.
  • ¿Cuáles son los métodos empleados en el inmunofenotipado?

    Tradicionalmente, se trataban las preparaciones de secciones de tejido fijadas en portaobjetos con anticuerpos específicos de un antígenocaracterísticamente hallado en algunas células anómalas asociadas a un tipo particular de leucemia o linfoma. Estos anticuerpos estaban marcados con peroxidasa o con un indicador fluorescente quepermitían identificar al microscopio las células anómalas de la preparación. La inmunohistoquímica se fundamenta en las propiedades inmunológicas de las células y presenta un gran valor en la evaluación de muestras de tejido, que pueden ser cruciales para establecer el diagnóstico o para identificar recidivas de la enfermedad.

    Otra técnica la constituye la citometría de flujo. Se trata la sangre, la médula ósea, un tejido o un fluido del organismo con anticuerpos marcados con marcadores fluorescentes. Estos anticuerpos se unen a los antígenos correspondientes, en caso de que estén presentes, en la superficie de los leucocitos; a menudo se habla de ellos como marcadores. Los leucocitos se suspenden en una solución y se pasan por un citómetro. La suspensión celular circula y atraviesa múltiples fuentes de láser, ocasionando una desviación o una absorción del rayo láser. Estas alteraciones en el haz de luz son identificadas por unos sensores muy sensibles que evalúan individualmente a las células en función de sus características físicas.

    La citometría de flujo mide de manera rápida características propias de las distintas células, como tamaño y presencia de gránulos (estructuras internas celulares), y evalúa el tipo y la cantidad de complejos fluorescentes antígeno-anticuerpo que se han formado. La ventaja de la citometría de flujo frente a la inmunohistoquímica radica en que se evalúan millares de células a la vez. En función de las características físicas de las células anómalas y de la presencia (o ausencia) de fluorescencia, el especialista puede determinar el tipo de leucemia o de linfoma que afecta al individuo.

Bibliografía

Este artículo está basado en las fuentes bibliográficas que se citan a continuación, así como en la propia experiencia del Comité de expertos y revisores de Lab Tests Online. Además, este apartado es revisado periódicamente por el Consejo Editorial, con el fin de mantenerlo actualizado.

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